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蛋白表达服务
蛋白表达技术可应用包括基因调控分析、蛋白结构及功能分析、蛋白质间相互作用分析等。对于特定的应用，使用正确的蛋白表达系统是实验成功的重要因素。在选择蛋白表达系统时，所需考虑的最重要因素是功能性、可溶性、速度及得率等。三羊开肽生物科技有限公司已成功构建完整的各种蛋白表达技术平台：包括原核蛋白表达与纯化、酵母蛋白表达与纯化、昆虫细胞蛋白表达与纯化、哺乳动物细胞蛋白表达与纯化。
根据客户的需求，我们提供从基因合成，载体构建，基因表达，蛋白纯化、检测等一站式服务。
为了保证蛋白纯化的质量，三羊开肽生物建立了严格的产品质控体系及一整套完善的客户服务流程、保密制度以确保为客户提供优质的产品及成熟的服务。 我们的蛋白质团队在优化基因密码子、表达载体的设计和构建、融合对象和标签的选取、特定蛋白纯化系统的选择、蛋白生产工艺的优化等方面，拥有较多的经验。可以满足客户个性化的需求。
原核蛋白表达与纯化
原核蛋白表达系统一般以大肠杆菌为宿主细胞。是将植物、动物、微生物等的目的基因插入合适载体后导入大肠杆菌表达出大量目的蛋白。由于细胞增殖快、培养周期短、表达量高、纯化方便、稳定性好、抗污染能力强、易于放大和成本低等优势，原核蛋白表达系统是迄今为止最为成熟可靠、蛋白表达实验中最常用、最经济实惠的表达系统。原核蛋白表达这种方法在蛋白纯化、定位及功能分析等方面都有应用。
原核蛋白表达技术服务按步骤收费，您可以从以下任意一步选择开始提供服务或仅选择其中的单独一步，详细价格请垂询。
如需前期分子生物学技术服务请参考相关内容。
服务特色：
1、提供多种表达载体和E. coli细胞，实现从基因到蛋白表达纯化的一站式解决方案，完成您的实验设计
2、技术成熟稳定、方法手段齐全。
3、服务周期短。
原核蛋白表达与纯化服务内容：
1、基因合成，
从基因中搜索目标蛋白的cDNA序列，根据选用的表达系统对cDNA进行密码子优化。
提供客户：合成设计好的基因序列及测序序列。
时间： 1~2周
2、载体构建（表达载体的设计和构建、融合对象和标签的选取。）
扩增并抽提构建好的表达质粒。
将表达质粒转化到高效的E. coli表达菌株中。
至少挑选数个阳性克隆于LB培养基中扩增并诱导表达目标蛋白。
SDS-PAGE电泳检测菌株中目标蛋白的表达情况，并挑选合适的单克隆菌株用于目标蛋白的表达。
提供客户：重组质粒的表达菌株及表达检测报告。
时间： 1~2周
3、摇瓶培养重组细菌，诱导表达目标蛋白。
对温度、时间、IPTG浓度等表达进行优化，诱导表达目标蛋白。
通过亲和，离子交换，疏水及凝胶过滤等多种层析方法纯化表达的重组蛋白。
利用蛋白酶去除不需要的纯化标签（Tag），再纯化获得所需的目标蛋白（可选，构建表达载体时需加入合适的蛋白酶切位点）。
三羊开肽生物科技有限公司会通过SDS-PAGE电泳检测每步结果并控制最终产品质量。
通过Western-blot验证目标蛋白正确性。
提供客户：纯化好的目标蛋白及纯化报告。可按客户要求提供含纯化标签（Tag）或切除纯化标签（Tag）的最终蛋白，纯度最高可达95%以上。
时间： 2~3周
4、大规模蛋白制备。
对蛋白生产工艺进行优化。按小试工艺放大生产规模，制备客户需要的合格蛋白产品。
提供客户：合格的目标蛋白及服务报告。
时间：协商
5、蛋白复性服务。
利用不同复性缓冲液的体系，对目标蛋白进行小量复性试验提供复性后样品供客户检测。 可根据客户要求，按照其中一种样品的复性条件制备小量的复性蛋白。三羊开肽生物科技有限公司可提供具体的复性缓冲液配方及复性工艺。
其他：内毒素去除、除菌，冻干等进一步加工。
通过质谱分析等方法详细检测目标蛋白的质量。
提供客户：加工后的最终产品及相关实验和检测报告。
时间：1~2周
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