多肽标记和修饰 三羊开肽生物能够提供数百种多肽的修饰和标记，详情询问销售人员
|
FITC
|
Rhodamine B
|
|
|
|
|
|
FITC Conjugated Peptides
|
FITC-Peptides Under Microscopy
|
Rhodamine in 3d model
|
Rhodamine B in solution
|
到目前为止，具有非常多的多肽标记及修饰的内容，它在多肽药物，多肽生物学，多肽抗体以及多肽试剂的研究中得到了广泛的应用。非放射性核素标记（C13，H2，N15），荧光标记（FAM，FITC等），生物素标记，磷酸化修饰等都是目前比较常用的多肽标记和修饰的内容。
1. 非放射性核素标记
目前在非放射性核素标记中，使用广泛的仍然是C13，H2，因为其使用安全，放射性小。现在有比较完全的非放射性标记的氨基酸，可以按照正常的多肽合成方法将标记好的氨基酸直接连接到多肽上。
2. 荧光标记
荧光标记所依赖的化合物称为荧光物质。荧光物质是指具有共轭双键体系化学结构的化合物，受到紫外光或蓝紫光照射时，可激发成为激发态，当从激发态恢复基态时，发出荧光。荧光标记技术指利用荧光物质共价结合或物理吸附在所要研究分子的某个基团上，利用它的荧光特性来提供被研究对象的信息。
荧光标记由于没有放射性，实验操作简单。因此，目前在生物学研究中荧光标记应用非常广泛，荧光标记方法与荧光试剂的结构有关系，对于有游离羧基的采用的方法与接肽反应相同，也采用HBTU/HOBt/DIEA方法连接。
在N端标记FITC的多肽需经历环化作用来形成荧光素，通常会伴有最后一个氨基酸的去除，但当有一个间隔器如氨基己酸，或者是通过非酸性环境将目的肽从树脂上切下来时，这种情况可避免。三羊开肽具有多种成熟的荧光标记多肽技术，优良的纯化生产工艺。
3. 生物素标记
3.70年代后期，免疫学中应用了生物素-亲合素系统 (biotin-avidin system，BAS)，并得到迅速发展，成为了一种新型生物反应放大系统。由于它具有生物素与亲合素之间高度亲和力及多级放大效应，并与荧光素、酶、同位素等免疫标记技术能够有机地结合，使各种示踪免疫分析的特异性和灵敏度进一步提高。主要应用于标记多肽氨基的生物素N-羟基丁二酰亚胺酯(BNHS)和生物素对硝基酚酯(pBNP)，其中相对最为常用的是BNHS，当然，也可以直接使用生物素标记，因为其结构上有个游离的羧基，所以在缩合时采用HBTU/HOBt/DIEA的方法。由于生物素的溶解度很低，可以使用DMSO/DMF的混合溶剂来增加溶解度。
4. 磷酸肽合成
在生命过程中，磷酸肽发挥了重要的作用，如DNA损伤修复、转录调节、信号转导、细胞凋亡的调节等。磷酸化多肽主要指肽链中的Ser，Thr，Tyr残基的侧链羟基被修饰成酸式磷酸酯多肽。目前为止，多肽的磷酸化修饰主要有后磷酸化法和单体法两种合成方法。后磷酸化法是多肽序列在树脂上合成完后，再对其中的Ser、Tyr或Thr的侧链羟基进行磷酸化；单体法则是将适当保护的磷酸化氨基酸直接引入到多肽序列中，这种方法较后磷酸化法操作更为简便，已经成为多肽磷酸化修饰的主要方法。
单体法修饰时，磷酸化的氨基酸由于侧链修饰的较大基团产生的位阻而导致难以与肽链缩合，并且之后的氨基酸引入都会比较困难，尤其在含有多个磷酸化位点修饰时，合成将变得异常困难，并且最终产物成分复杂，难以分离，产率极低。因此，当肽链中多个位点进行磷酸化时，可以考虑采用后磷酸化法，其合成过程主要就是在多肽合成结束之后，选择性的脱去要标记氨基酸的侧链保护基，对于Tyr，Thr可以直接使用侧链不保护的氨基酸进行反应，而Ser可以采用Fmoc-Ser（trt），在1% TFA/DCM条件下可以定量的脱除。后磷酸化，采用双苄基亚磷酰胺，四氮唑生成亚磷酰胺四唑活性中间体，连接到羟基上，随后在过氧酸下氧化生成磷酰基，完成反应。