磷酸化抗体定制

磷酸化抗体定制

翻译后修饰对蛋白质生物学功能至关重要,在生命现象的许多关键调节机制中发挥重要作用,其中蛋白质的磷酸化是最常见的重要翻译后修饰之一,它参与了体内几乎所有的细胞活动,与信号传导,细胞周期,增殖代谢,生长发育以及癌症机理等诸多生物学问题有密切关系。由于磷酸化蛋白质可以发挥复杂的作用,在细胞水平上准确和精确地定量磷酸化蛋白质对于破译和了解细胞功能至关重要。

 蛋白质磷酸化修饰是指通过蛋白质磷酸激酶将ATP分子中的磷酸基转移到蛋白质分子特定位点(Ser、Thr、Tyr残基等)的过程。有研究表明通过多位点的磷酸化修饰,可以调节蛋白质之间的相互作用。蛋白质磷酸化水平的异常上调或者下调和多种疾病如癌症、糖尿病、代谢综合症、阿尔兹海默症等的发生密切相关。因此,研究蛋白质磷酸化修饰在多种生物和非生物胁迫领域中的特征对研究蛋白质的功能是十分必要的。

磷酸化抗体主要是针对磷酸化位点制备的,可以特异性识别磷酸化氨基酸位点,检测蛋白磷酸化水平,对磷酸化蛋白进行定性、定量分析。磷酸化抗体可以用来检测该蛋白在细胞受到刺激时的磷酸化水平的变化情况,侧重于了解该蛋白的一种活性状态,广泛应用于免疫学、生物化学、肿瘤学、蛋白质组学,尤其在细胞信号传导及凋亡、癌症等生命科学中的研究。

三羊开肽生物科技有限公司提供的磷酸化抗体定制服务包括: 磷酸化多肽设计与合成、动物偶联免疫、单克隆筛选与建库、抗体生产与纯化、抗体质量验证与交付。 最终交付的抗体将通过磷酸化多肽与非磷酸化多肽的双重检测确认,保证质量合格。 磷酸化抗体可以特异性识别磷酸化的氨基酸位点。磷酸化抗体可以用于区分蛋白质的磷酸化及非磷酸化的存在形式,可用于对磷酸化蛋白进行定性、定量分析。 三羊开肽生物科技有限公司的专业化抗体研发团队在分析、设计、合成磷酸化多肽及磷酸化抗体制备技术上具有丰富的经验。我们提供磷酸化多克隆抗体服务和磷酸化单克隆抗体服务。在磷酸化多抗定制服务中,动物免疫后收集的血清先通过磷酸化多肽亲和层析柱纯化,再将得到的初步纯化抗体用非磷酸化多肽亲和层析柱吸收,最终交付的磷酸化抗体是经BSA交联的磷酸化多肽与非磷酸化多肽双重检测确认的,进而确保了磷酸化抗体交付质量。


磷酸化多克隆抗体制备(兔)
服务阶段 服务内容 交付产品
阶段一 设计合成磷酸化多肽 合成10mg磷酸化多肽和5mg非磷酸化多肽 • 2~3mg多肽(非磷酸化多肽和磷酸化多肽)
• 1~2ml免疫前血清
• 2~5mg磷酸化抗体
• ELISA检测结果
• 项目报告
阶段二 多肽偶联 合成多肽与载体蛋白偶联(KLH,BSA)
阶段三 抗血清制备 免疫兔子,免疫前采血,免疫四次并采集血清
阶段四 小规模纯化 血清小样采集和检测
阶段五 抗原亲和纯化 制备磷酸化亲和纯化柱,非磷酸化多肽亲和柱去除交叉反应
阶段六 检测 ELISA检测效价

磷酸化单克隆抗体制备(小鼠)
服务阶段 服务内容 交付产品
阶段一 设计合成磷酸化多肽 合成10mg磷酸化多肽和5mg非磷酸化多肽 • 5mg修饰多肽、3mg未修饰多肽和抗体产品
• 50ul免疫前血清
• 2-5株杂交瘤细胞
• 3-8mg纯化抗体(2株杂交瘤)ELISA检测结果
• 亚型鉴定结果
• 完整项目报告
阶段二多肽偶联 合成多肽与载体蛋白偶联(KLH,BSA)
阶段三动物免疫与检测 免疫小鼠并用磷酸化和非磷酸化多肽进行ELISA检测
阶段四细胞融合 磷酸化多肽显示出的最佳免疫应答小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞进行细胞融合
阶段五增殖与筛选 ELISA检测出阳性克隆并进行亚克隆
阶段六腹水制备及纯化 腹水制备,Protein G纯化
阶段七检测 ELISA检测效价
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